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發(fā)揮專業(yè)優(yōu)勢 拓寬服務(wù)領(lǐng)域!維真生物與宜明細(xì)胞強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合,布局mRNA賽道,依托成熟穩(wěn)定的工藝,已開發(fā)并建立起完善的mRNA工藝平臺,確保mRNA高效的體外轉(zhuǎn)錄合成,可以為客戶提供從基因合成、高效體外轉(zhuǎn)錄模板制備、質(zhì)粒線性化、 IVT mRNA合成、純化質(zhì)檢到LNP封裝全套服務(wù)。
我們完善的mRNA體外合成一站式整體解決方案,不僅限于RUO(Research Use Only)級別的mRNA,還包括GMP級別的mRNA產(chǎn)品,根據(jù)客戶的不同階段的需求,完成個(gè)性化的合成制備。合成后的mRNA可用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染、顯微注射、體外翻譯和RNA疫苗開發(fā)等,我們合力打造一體化的mRNA藥物服務(wù)平臺。
IVT mRNA合成是整個(gè)mRNA制備過程中的核心環(huán)節(jié),體外轉(zhuǎn)錄所用的質(zhì)粒模板、轉(zhuǎn)錄和修飾工藝、質(zhì)量控制等至關(guān)重要。維真生物擁有覆蓋上萬種人源基因的質(zhì)粒庫平臺,可以作為體外轉(zhuǎn)錄的現(xiàn)貨模板,節(jié)約模板制備的時(shí)間。此外,超越同行的模板質(zhì)粒優(yōu)化技術(shù)、成熟的mRNA修飾工藝、極高的轉(zhuǎn)錄效率,結(jié)合反應(yīng)過程中的多步純化工藝,保證最終mRNA的質(zhì)量和產(chǎn)量。
同時(shí),為了加快mRNA的研發(fā)進(jìn)程,提供多種mRNA預(yù)制品,涵蓋:
① 表達(dá)高靈敏的NeoGreen+ teLuciferase的雙光系統(tǒng)報(bào)告基因的mRNA;
② 表達(dá)GFP和RFP報(bào)告基因的mRNA;
③ 表達(dá)高靈敏鈣離子感受器的mRNA;
④ 表達(dá)Cas9/12/13/14的mRNA;
⑤ 表達(dá)新冠病毒刺突蛋白(全長)的mRNA等。
宜明細(xì)胞擁有高效的臨床級質(zhì)粒DNA原液制備平臺,質(zhì)粒的生產(chǎn)提取和純化工藝成熟穩(wěn)定,平臺配備了50L-200L的原核發(fā)酵一次性生物反應(yīng)器,發(fā)酵過程無抗生素發(fā)酵,無動(dòng)物源成分,發(fā)酵產(chǎn)量大于1g/L。
同時(shí)宜明細(xì)胞擁有穩(wěn)定的臨床級mRNA原液制備平臺,在 T7、SP6 或 T3 等 RNA 多聚酶的作用下,體外轉(zhuǎn)錄成為帶polyA尾的mRNA,并進(jìn)行一步或者兩步法加上 5’的 Cap,再進(jìn)一步使用 DNA 酶將殘留的 DNA 模板進(jìn)行消除;純化使用離子交換等層析步驟進(jìn)一步將轉(zhuǎn)錄形成的 mRNA 進(jìn)行純化,超濾濃縮形成原液。
除了mRNA的合成修飾外,如何將mRNA安全有效地從細(xì)胞外遞送進(jìn)細(xì)胞內(nèi),也是mRNA技術(shù)開發(fā)的重點(diǎn)和難點(diǎn)。我們采用簡便快速,條件溫和,并且易于生產(chǎn)放大的微流控技術(shù)進(jìn)行mRNA脂質(zhì)體(mRNA-LNP)的制備,將mRNA包裹在脂質(zhì)納米顆粒LNP中,有效地保護(hù)mRNA并將其轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞中發(fā)揮功能。
mRNA制劑的主要工藝環(huán)節(jié)包括mRNA的包封/裝載、復(fù)合物純化、除菌過濾、無菌灌裝。在這些環(huán)節(jié)中,對無菌污染的控制至關(guān)重要,要考慮到設(shè)備、人員、物料、環(huán)境和操作方法等各個(gè)方面,如無菌灌裝、加塞及產(chǎn)品未完全密封時(shí)的轉(zhuǎn)移等操作均需要在A級環(huán)境進(jìn)行。宜明細(xì)胞全自動(dòng)制劑灌裝線可實(shí)現(xiàn)多批量灌裝,灌裝環(huán)境為全封閉式隔離器絕對A級環(huán)境。
我們生產(chǎn)的mRNA-LNP具有以下特點(diǎn):
① 批次一致性良好;
② 粒徑可控(50-200nm以內(nèi));
③ 包封效果可達(dá)80%以上;
④ 可為客戶提供mg至g級別的mRNA產(chǎn)品。
理論上我們可以為客戶提供任意蛋白的mRNA和mRNA-LNP的制備。此外,還可以為客戶提供多維度的mRNA檢測服務(wù),包括但不限于:
1) mRNA 完整性和純度檢測
2) LNP 包裝率檢測
3) LNP 粒徑檢測
4) 更多定制化檢測(可選)
a) 殘留檢測(如 T7-RNApol、DNaseI、RNase inhibitor、dsRNA/DNA/線性RNA等)
b) mRNA帽子結(jié)構(gòu)檢測
c) 細(xì)胞學(xué)表達(dá)測試
d) 動(dòng)物水平表達(dá)測試
● RUO
● GMP
1. 提供預(yù)制或定制化mRNA,滿足客戶多樣化需求;
2. 微流控技術(shù)進(jìn)行mRNA-LNP制備,包裝率高,易于生產(chǎn)放大;
3. 擁有轉(zhuǎn)錄模板質(zhì)粒庫,可提供基因合成到mRNA合成一站式生產(chǎn);
4. 專業(yè)的序列優(yōu)化和修飾技術(shù),顯著降低免疫原性,提高表達(dá)效率;
5. 針對項(xiàng)目需求提供多元化QC工藝,可用于科研實(shí)驗(yàn),助力臨床研究;
6. 擁有GMP質(zhì)粒DNA原液生產(chǎn)平臺和mRNA原液生產(chǎn)平臺;
7. 全封閉式隔離器自動(dòng)化灌裝線可滿足不同需求的制劑灌裝要求;
8. mRNA一站式CRO和CDMO整體解決方案,全流程質(zhì)量管理。