猴痘假病毒
SARS-CoV-2假病毒
自2022年5月以來(lái)，多國(guó)陸續(xù)發(fā)現(xiàn)猴痘病例，并迅速向全球蔓延。7月23日，世界衛(wèi)生組織（WHO）宣布，猴痘疫情已構(gòu)成“國(guó)際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”，這是世衛(wèi)組織針對(duì)全球突發(fā)公共衛(wèi)生事件發(fā)出的最高級(jí)別警報(bào)。雖然，針對(duì)天花病毒的疫苗和藥物為應(yīng)對(duì)猴痘提供了選擇，但目前尚沒(méi)有針對(duì)MPV的特異性疫苗和特效藥物。維真生物積極響應(yīng)，開發(fā)出可用于MPV核酸檢測(cè)試劑盒性能測(cè)試的假病毒系列產(chǎn)品，助力猴痘致病機(jī)理及防治等相關(guān)研究。
1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
維真生物基于全面的病毒包裝平臺(tái)和穩(wěn)定的生產(chǎn)工藝，將Monkeypox Virus （MPV）特異性靶標(biāo)序列F3L 和包膜蛋白B6R 的基因序列，分別克隆構(gòu)建至慢病毒，腺病毒和腺相關(guān)病毒（AAV）載體上，成功開發(fā)出高質(zhì)量的猴痘假病毒系列產(chǎn)品，并且具有良好的生物安全性和穩(wěn)定性。
貨號(hào)
名稱
規(guī)格
MVLV10001
pLenti-Monkeypox Virus-B6R假病毒
≥1*10E8TU/ml, 1ml
MVLV10002
pLenti-Monkeypox Virus-F3L假病毒
≥1*10E8TU/ml，1ml
MVAD10001
pADM-Monkeypox Virus-B6R假病毒
≥1*10E10pfu/ml，1ml
MVAD10002
pADM-Monkeypox Virus-F3L假病毒
≥1*10E10pfu/ml, 1ml
MVAV10001
pAV-Monkeypox Virus-B6R假病毒
≥5*10E12vg/ml，1ml
MVAV10002
pAV-Monkeypox Virus-F3L假病毒
≥5*10E12vg/ml 1ml
*除上述F3L和B6R的載體和病毒產(chǎn)品外，我們還可以提供其他猴痘相關(guān)基因的載體構(gòu)建與病毒包裝定制服務(wù) ，助力猴痘病毒的研究，歡迎各位老師垂詢！
2. 產(chǎn)品用途
用于猴痘病毒核酸檢測(cè)試劑盒的開發(fā)和性能評(píng)價(jià)，效果驗(yàn)證，作為qPCR實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品使用。
3. 研究背景
1.猴痘病毒簡(jiǎn)介
猴痘病毒(monkeypox virus，MPV) 屬于痘病毒科正痘病毒屬，同屬的還有天花病毒、牛痘病毒和痘苗病毒。MPV是一種有包膜的線性雙鏈DNA病毒，基因組大小約197kb，被包裹在直徑為140-260nm多晶的啞鈴形核內(nèi)，病毒顆粒呈磚形或橢圓形。MPV基因組有一個(gè)高度保守的中央編碼區(qū)，約56-120 kb，兩側(cè)是可變區(qū)域和末端重復(fù)序列。根據(jù)遺傳、地理和表型變異，該病毒有兩個(gè)不同的分支，即西非和剛果盆地，后者也被稱為中非分支，毒性最強(qiáng)。通過(guò)全基因組測(cè)序已獲知本次疫情傳播的病毒屬于較溫和的西非分支。
彩色透射電子顯微鏡捕獲的猴痘病毒顆粒
（來(lái)源英國(guó)《新科學(xué)家》雜志網(wǎng)站）
2.MPV感染癥狀
MPV引起的人類疾病癥狀與天花相似，但其致命性和傳染性不如天花病毒。猴痘潛伏期為5-21天，最先是發(fā)熱階段，通常持續(xù)1至3天，癥狀包括發(fā)熱、寒戰(zhàn)、劇烈頭痛、淋巴結(jié)腫大、背部疼痛、肌肉疼痛和疲勞至極。發(fā)熱期過(guò)后是皮疹期，通常持續(xù)2-4周，患者先是面部出現(xiàn)皮疹，隨后擴(kuò)散到身體其他部位，皮疹病變由斑疹(基底扁平)演變?yōu)榍鹫?隆起、堅(jiān)硬、疼痛)、小泡(充滿透明液體)、膿皰(充滿膿液)，最后是結(jié)痂。根據(jù)感染MPV的分支和醫(yī)療情況，MPV致死率為0~11%，幼兒死亡率更高。
MPV感染癥狀
（Narendra Kumar, Journal of Autoimmunity. 2022）
3.MPV入侵細(xì)胞機(jī)制
與多數(shù)DNA病毒不同，MPV在受感染細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)復(fù)制，而非細(xì)胞核內(nèi)。MPV復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生兩種感染性病毒顆粒：細(xì)胞內(nèi)成熟病毒(MV)和細(xì)胞外包膜病毒(EV)，其中，MV通過(guò)微胞飲或膜融合進(jìn)入細(xì)胞，而EV通過(guò)膜融合進(jìn)入。MV外有一層脂蛋白包膜，包裹病毒核心和包含蛋白質(zhì)的側(cè)體，在外界環(huán)境中相對(duì)穩(wěn)定，主要參與介導(dǎo)宿主之間的傳播；EV由脂質(zhì)膜包裹MV外周形成，它來(lái)源于高爾基體或核內(nèi)體。在胞質(zhì)內(nèi)完成病毒DNA的復(fù)制和病毒蛋白的組裝后，MV經(jīng)細(xì)胞裂解被釋放，而EV則通過(guò)胞吐作用離開細(xì)胞。
值得注意的是，MPV的復(fù)制，轉(zhuǎn)錄，組裝和釋放過(guò)程由多個(gè)不同的蛋白質(zhì)參與。
MPV的生命周期
（Narendra Kumar, Journal of Autoimmunity. 2022）
4.MPV傳播途徑
猴痘是一種人畜共患病，即一種由動(dòng)物傳播給人類的疾病。目前，MPV的宿主仍不清楚，非洲的嚙齒動(dòng)物可能參與了MPV感染傳播。MPV可通過(guò)接觸受感染動(dòng)物的體液、病變皮膚或內(nèi)部粘膜、呼吸道飛沫或受感染物品進(jìn)行傳播。
5.MPV檢測(cè)方法
由于MPV感染的臨床表現(xiàn)難以與其他痘病毒引起的疾病區(qū)分。因此，快速有效的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法對(duì)控制MPV的暴發(fā)流行至關(guān)重要。
①PCR
PCR技術(shù)是檢測(cè)猴痘病毒DNA的首選方法。一般來(lái)說(shuō)，通常選擇胞外包膜蛋白基因(B6R)、DNA聚合酶基因E9L，DNA依賴的RNA聚合酶亞基18 (RPO18)基因以及補(bǔ)體結(jié)合蛋白C3L、F3L和N3R基因的保守區(qū)域作為PCR擴(kuò)增的靶標(biāo)。PCR診斷標(biāo)本可直接來(lái)自皮疹——皮膚、液體或痂皮。此外，重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)技術(shù)和限制性長(zhǎng)度片段多態(tài)性(RFLP) 技術(shù)也已被開發(fā)用于MPV DNA 檢測(cè)。
②血清學(xué)實(shí)驗(yàn)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)可檢測(cè)患者血清中的特異性IgM和IgG 抗體。由于MPV與其他痘病毒之間存在抗原交叉反應(yīng)，此方法特異性較低。
③電鏡觀察
可利用電鏡觀察病毒的形態(tài)特征，同樣地，由于MPXV和其他痘病毒在形態(tài)上無(wú)法區(qū)分，該方法缺乏準(zhǔn)確性。此外，電鏡觀察靈敏度不高且樣品制備復(fù)雜，周期較長(zhǎng)。
④其他方法
免疫化學(xué)分析和多重免疫熒光成像可用于MPV抗原檢測(cè)。
6.MPV預(yù)防及治療
大多數(shù)人類猴痘感染最初是由動(dòng)物向人傳播造成的，應(yīng)避免接觸患病或死亡的動(dòng)物，同時(shí)避免與感染者或受污染物質(zhì)密切接觸。目前，還沒(méi)有針對(duì)MPV感染的特異性疫苗和特異性藥物。據(jù)報(bào)道，天花疫苗可對(duì)猴痘提供85%的免疫保護(hù)。目前，預(yù)防天花病毒和MPV的兩種疫苗已獲批準(zhǔn)：第二代疫苗ACAM 2000和第三代疫苗IMVAMUNE。此外，抗天花病毒藥物也可發(fā)揮一定的抗MPV作用。
用于預(yù)防和治療人類痘病毒的候選疫苗和抗病毒藥物
（Gong Q et al. Virologica Sinica. 2022）
參考來(lái)源
1、https://www.who.int/health-topics/monkeypox#tab=tab_1.
2、Kumar N, Acharya A, Gendelman HE, Byrareddy SN. The 2022 outbreak and the pathobiology of the monkeypox virus. J Autoimmun. 2022 Jul;131:102855. doi: 10.1016/j.jaut.2022.102855. Epub 2022 Jun 25. PMID: 35760647.
3、Gong Q, Wang C, Chuai X, Chiu S. Monkeypox virus: a re-emergent threat to humans. Virol Sin. 2022 Jul 9:S1995-820X(22)00120-1. doi: 10.1016/j.virs.2022.07.006. Epub ahead of print. PMID: 35820590.
4、Kabuga AI, El Zowalaty ME. A review of the monkeypox virus and a recent outbreak of skin rash disease in Nigeria. J Med Virol. 2019 Apr;91(4):533-540. doi: 10.1002/jmv.25348. Epub 2018 Nov 19. PMID: 30357851.
