服務(wù)上新丨維真AAV中和抗體檢測服務(wù)
服務(wù)上新丨維真AAV中和抗體檢測服務(wù)
背景介紹
AAV由于高組織特異性、良好的擴(kuò)散性、低免疫原性、高安全性和穩(wěn)定性等特點(diǎn)，已經(jīng)成為科研和基因治療中極具市場前景的病毒載體之一。AAV衣殼蛋白種類豐富，其中2型和9型AAV作為基因療法中的病毒載體研究較多，且已經(jīng)應(yīng)用于臨床。目前，基于AAV2載體的Luxturna（Spark Therapeutics公司開發(fā)，用于治療Leber先天性黑蒙2型）以及基于AAV9載體的Zolgensma（諾華公司開發(fā)，用于治療脊髓性肌萎縮癥）已獲批在患者身上使用，并顯現(xiàn)出較好的治療效果。
然而針對AAV衣殼的中和抗體在大多數(shù)試驗(yàn)動物和人群中普遍存在，當(dāng)載體進(jìn)入血液中時中和抗體可阻斷AAV轉(zhuǎn)導(dǎo)。尤其是當(dāng)AAV應(yīng)用于基因治療時，體內(nèi)預(yù)存的抗AAV的中和抗體會降低基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率，這大大限制了AAV的應(yīng)用。因此，為提高AAV治療的有效性，提前檢測受試者或動物體內(nèi)是否存在AAV中和抗體十分必要，對臨床或臨床前試驗(yàn)中AAV血清型的適用性具有指導(dǎo)意義。
預(yù)存中和抗體大大降低基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率
檢測方法
維真生物利用熒光素酶報告系統(tǒng)在體外進(jìn)行AAV中和抗體的檢測，可以檢測待測樣本中是否有特定血清型的中和抗體，以方便客戶選擇不同的動物模型或者不同血清型的AAV。通過檢測Luciferase發(fā)光值RLU，根據(jù)發(fā)光值計(jì)算待檢樣本中抗AAV病毒的中和抗體是否存在，判斷血清/抗體對該血清型的AAV病毒是否具有中和活性。
如果受試樣品中預(yù)存大量抗AAV的中和抗體，那就說明，需要更大劑量的AAV才能起到較好的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效果，那么此種血清型對該動物體來說并非理想選擇，需要更換AAV血清型或者動物模型進(jìn)行下一步的研究或者臨床試驗(yàn)。
中和抗體檢測服務(wù)項(xiàng)目
一、服務(wù)項(xiàng)目
AAV中和抗體檢測服務(wù)
二、服務(wù)類型
定性檢測、定量檢測
三、待測樣本
① 血清樣本，干冰運(yùn)輸；
② 體積：≥200μL；
③ 要求：無菌，乙肝、丙肝、HIV、梅毒、EB、CMV檢測陰性；
四、服務(wù)流程
確定檢測方案 → 簽訂合同 → 寄送待檢樣品 → 檢測中和抗體 → 出具檢測報告
五、服務(wù)周期
自收到待檢樣本起5個工作日
六、服務(wù)說明
① 可提供AAV1/2/5/6/7/8/9等中和抗體檢測；
② 檢測數(shù)據(jù)及報告僅對受試樣本負(fù)責(zé)；
七、數(shù)據(jù)支持
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AAV2-CMV-LUC中和抗體檢測結(jié)果
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AAV9-CMV-LUC中和抗體檢測結(jié)果
檢測步驟：
將待測樣品按以下梯度進(jìn)行稀釋：30X、60X、120X、240X、 480X、960X，每個梯度取10uL分別與10uL不同血清型的AAV病毒共同孵育，孵育完成后將混合液感染293T細(xì)胞，感染24h后用酶標(biāo)儀檢測RLU發(fā)光值。綜合以上，在血清1:60稀釋時，無論AAV2還是AAV9抑制率均能接近100%。
八、服務(wù)優(yōu)勢
① 靈敏性高：在血清稀釋240-480倍后仍可以檢測出中和抗體；
② 特異性強(qiáng)：在無抗體的血清中，完全檢測不到中和抗體；
③可重復(fù)性好：多次試驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)之間差異極小。
