定點(diǎn)突變(site directed mutagenesis)可以隨心所欲地改變已知DNA序列中的堿基。根據(jù)堿基變化的情況，定點(diǎn)突變通常包括堿基置換(base substitution)、堿基缺失(deletion)和 堿基插入(insertion)三種。根據(jù)堿基變化后氨基酸是否改變，基因突變又可分為同義突變(same sense mutation)、錯(cuò)義突變(missense mutation)和無(wú)義突變(nonsense mutation)。
在基礎(chǔ)研究中，研究者通常通過(guò)改變DNA序列獲得突變基因，以研究基因結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系；或者通過(guò)改變氨基酸序列獲得突變蛋白，以研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系，從微觀水平闡明生理狀態(tài)下基因的調(diào)控機(jī)理、疾病的病因和發(fā)病機(jī)制。
定點(diǎn)突變的常用方法-PCR法
PCR法進(jìn)行定點(diǎn)突變的大致流程：設(shè)計(jì)突變引物；overlap PCR；DpnI酶(能夠識(shí)別甲基化位點(diǎn)并將其酶切)消化模板；DpnI酶處理過(guò)的PCR產(chǎn)物轉(zhuǎn)化；挑菌，測(cè)序驗(yàn)證。其示意圖如下：
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1.
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突變模板即選即用：維真生物擁有2大人源基因質(zhì)粒庫(kù)，包括人源ORF cDNA克隆和人源microRNA克??；
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2.
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后續(xù)服務(wù)貼心：維真生物可以為您提供亞克隆、腺病毒包裝、慢病毒包裝、AAV包裝服務(wù)和基因表達(dá)分析等后續(xù)服務(wù)；
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3.
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價(jià)格公道、合理。
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1. 做點(diǎn)突變服務(wù)，我需要提供哪些材料以及信息？
需要提供的材料：
模版質(zhì)?！?ug或有含有模板質(zhì)粒的菌液；如果您還需要公司幫您做亞克隆，您還需提供含有目的載體的質(zhì)粒或菌液；
需要提供的信息：
①模版基因名稱及序列（突變前序列），模版序列的測(cè)序結(jié)果；
②模版序列所在載體信息：載體全稱、大小及抗性；
③突變后基因名稱及序列；
*如果您還需要公司幫您做亞克隆，您還需提供目的載體信息：載體全稱，大小及抗性，如果是非商業(yè)化載體，需要提供載體全序列或圖譜；
2. 多長(zhǎng)堿基內(nèi)的突變算一個(gè)突變？
6bp內(nèi)的突變算一個(gè)突變。
3. 如果我在突變的同時(shí)還需要更換目的載體，公司該如何收費(fèi)？
如果您在定點(diǎn)突變的同時(shí)還需要更換目的載體，您需要額外支付亞克隆費(fèi)用。
