關(guān)于『細(xì)胞自噬』，你了解多少？
1.細(xì)胞自噬簡(jiǎn)介
細(xì)胞自噬（autophagy=self-eating）意為自體吞噬，是真核細(xì)胞在細(xì)胞自噬相關(guān)基因（autophagy related gene，Atg）的調(diào)控下利用溶酶體降解自身細(xì)胞質(zhì)蛋白和受損細(xì)胞器的過(guò)程。細(xì)胞自噬可防止細(xì)胞損傷，促進(jìn)細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)缺乏的情況下存活，并對(duì)細(xì)胞毒性刺激作出反應(yīng)。細(xì)胞自噬包括生理?xiàng)l件下的基礎(chǔ)型細(xì)胞自噬和應(yīng)激條件下的誘導(dǎo)型細(xì)胞自噬。前者是細(xì)胞的自我保護(hù)機(jī)制，有益于細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，保護(hù)細(xì)胞防止代謝應(yīng)激和氧化損傷，對(duì)維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)以及細(xì)胞產(chǎn)物的合成、降解和循環(huán)再利用具有重要作用；但細(xì)胞自噬過(guò)度可能導(dǎo)致代謝應(yīng)激、降解細(xì)胞成分，甚至引起細(xì)胞死亡等。研究表明，細(xì)胞自噬能在細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、衰老、免疫、腫瘤發(fā)生及神經(jīng)退行性疾病等多種生理病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
根據(jù)包裹物質(zhì)及運(yùn)送方式的不同可將細(xì)胞自噬分為3種類(lèi)型（圖1）：
① 巨細(xì)胞自噬（macroautophagy）：通過(guò)形成具有雙層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞自噬體（autophagosome）包裹胞內(nèi)物質(zhì)，最終細(xì)胞自噬體與溶酶體融合。一般情況下所說(shuō)的細(xì)胞自噬是指巨細(xì)胞自噬。
② 微細(xì)胞自噬（microautophagy）：通過(guò)溶酶體或液泡表面的形變直接吞沒(méi)特定的細(xì)胞器。
③ 分子伴侶介導(dǎo)的細(xì)胞自噬（chaperone-mediated autophagy, CMA）：具有KEFRQ樣基序的蛋白在HSP70伴侶的幫助下，通過(guò)LAMP-2A轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)運(yùn)到溶酶體。
圖1. 3種細(xì)胞自噬途徑
(Duraes Fernanda V et al. Front Immunol, 2015)
2.細(xì)胞自噬的發(fā)生過(guò)程
細(xì)胞自噬是一種在進(jìn)化上保守的細(xì)胞內(nèi)分解代謝過(guò)程，在該過(guò)程中，細(xì)胞質(zhì)大分子、聚集性蛋白、受損細(xì)胞器或病原體被運(yùn)送至溶酶體，并被溶酶體水解酶降解，產(chǎn)生核苷酸、氨基酸、脂肪酸、糖和三磷酸腺苷，最終再循環(huán)到胞漿中。諸如饑餓、輻射、缺氧、細(xì)菌入侵、生長(zhǎng)因子匱乏等多種因素均可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬發(fā)生。
細(xì)胞自噬的發(fā)生過(guò)程大體分為以下4個(gè)階段（圖2）：
①細(xì)胞自噬的起始 在細(xì)胞自噬誘導(dǎo)信號(hào)的調(diào)控下，ULK1復(fù)合物和多種ATG蛋白被活化，并定位于前細(xì)胞自噬體處。
②隔離膜和細(xì)胞自噬體的形成 ATG蛋白和脂質(zhì)不斷被募集，從而形成杯狀的雙層膜結(jié)構(gòu)（隔離膜，phagophore）；隨著隔離膜的逐漸延伸，將要被降解的胞漿成分完全包裹，最終形成閉合的細(xì)胞自噬體（autophagosome）。
③細(xì)胞自噬體與溶酶體融合 細(xì)胞自噬體形成后將其包裹物通過(guò)胞內(nèi)運(yùn)輸系統(tǒng)運(yùn)輸至溶酶體，并與溶酶體融合。
④細(xì)胞自噬體的裂解 細(xì)胞自噬體與溶酶體融合后形成細(xì)胞自噬溶酶體（autolysosome），最終在溶酶體水解酶的作用下降解其包裹物。
總而言之，細(xì)胞自噬的本質(zhì)其實(shí)是細(xì)胞內(nèi)的膜重排。在膜重排的過(guò)程中，會(huì)形成一個(gè)具有雙層膜并裹挾著隨機(jī)或特定底物的封閉囊泡，即細(xì)胞自噬體，進(jìn)而與溶酶體融合，形成細(xì)胞自噬溶酶體并降解底物。
圖2. 細(xì)胞自噬的發(fā)生過(guò)程 （Li et al. Molecular Cancer，2020）
3.細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白
細(xì)胞自噬的發(fā)生與營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、能量狀態(tài)、氧化應(yīng)激、缺血缺氧等相關(guān)，其受多重機(jī)制調(diào)節(jié)，如ULK1通路、Beclin1通路、AMPK通路等。在細(xì)胞自噬的發(fā)生過(guò)程中，有多種細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白可調(diào)節(jié)和控制細(xì)胞自噬形成的不同階段。
如圖2所示，在細(xì)胞自噬的發(fā)生過(guò)程中，多種細(xì)胞自噬相關(guān)基因調(diào)控細(xì)胞自噬流的不同階段。迄今為止，科學(xué)家已在酵母中鑒定出40余個(gè)編碼ATG蛋白的基因，并且大多數(shù)在酵母和哺乳動(dòng)物之間高度保守。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，饑餓誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬大約受20種核心ATG基因調(diào)節(jié)，它們?cè)谝号莞浇徊粩嗄技?，并組裝形成細(xì)胞自噬前體。這些基因的分類(lèi)和作用（表1）如下：
①ULK1激酶核心復(fù)合物 包括ULK1/2、ATG13、RB1CC1/FIP200和 ATG101；
②PI3K復(fù)合物 包括VPS34、VPS15、Beclin1和ATG14L；
③ATG9A轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng) 包括ATG9A、WIPI1/2和ATG2A；
④ATG12泛素樣結(jié)合系統(tǒng) 包括ATG12、ATG7、ATG10、ATG5和ATG16L1；
⑤LC3泛素樣結(jié)合系統(tǒng) 包括LC3A/B/C、ATG7、ATG3和ATG4A/B/C/D。
表1. 細(xì)胞自噬相關(guān)基因及其在細(xì)胞自噬中的蛋白質(zhì)功能
（Li et al. Molecular Cancer，2020）
4.細(xì)胞自噬的調(diào)控
細(xì)胞基礎(chǔ)水平的細(xì)胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，對(duì)細(xì)胞自噬研究多需人工干預(yù)。
雷帕霉素靶蛋白（mTOR）激酶在細(xì)胞自噬反應(yīng)中起著重要的調(diào)節(jié)作用。mTOR（Akt and MAPK signaling）在被mTOR激酶激活后，細(xì)胞自噬反應(yīng)被抑制；而在mTOR（AMPK and p53 signaling）被抑制后，細(xì)胞自噬反應(yīng)機(jī)制啟動(dòng)。細(xì)胞自噬相關(guān)基因（autophagy related gene，Atg）通過(guò)形成Atg12-Atg5 和 LC3-II (Atg8-II)復(fù)合物來(lái)調(diào)控細(xì)胞自噬體的形成。
細(xì)胞自噬既能抑制也能促進(jìn)細(xì)胞凋亡，兩種反應(yīng)在生物體內(nèi)廣泛存在。在營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)，細(xì)胞自噬反應(yīng)作為一個(gè)細(xì)胞的促活反應(yīng)機(jī)制存在，但是過(guò)量的細(xì)胞自噬反應(yīng)也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，但由細(xì)胞自噬導(dǎo)致的細(xì)胞死亡與細(xì)胞凋亡在形態(tài)學(xué)上有明顯的不同。幾種促凋亡信號(hào)因子，如TNF、TRAIL和 FADD也會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的反應(yīng)發(fā)生。此外，Bcl-2也是細(xì)胞自噬反應(yīng)重要的調(diào)節(jié)因子，其為凋亡抑制蛋白，通過(guò)與Beclin-1結(jié)合形成復(fù)合物，來(lái)抑制由Beclin-1誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬。
已報(bào)道的部分干預(yù)藥物詳見(jiàn)表2：
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細(xì)胞自噬激動(dòng)劑
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細(xì)胞自噬拮抗劑
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Rapamycin：雷帕霉素，mTOR抑制劑（最常用）；
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Chloroquine：氯奎寧，溶酶體抑制劑；
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EBSS：Earle's平衡鹽溶液，制造饑餓；
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Bafilomycin A1：巴佛洛霉素A1，質(zhì)子泵抑制劑；
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Lithium Chloride：氯化鋰，IMPase 抑制劑
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3-Methyladenine：3-甲基腺嘌呤hVps34抑制劑；
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Xestospongin B/C：光溜海綿素 B/C，IP3R阻滯劑等。
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NH4Cl：氯化銨，溶酶體抑制劑等。
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表2. 細(xì)胞自噬激動(dòng)劑和拮抗劑
目前常用的細(xì)胞自噬激動(dòng)劑有Rapamycin，EBSS等，常用的細(xì)胞自噬抑制劑有Chloroquine，3-MA，NH4Cl和 Bafilomycin A1等。這些細(xì)胞自噬激動(dòng)劑和抑制劑可以分別激活/抑制細(xì)胞自噬發(fā)生的不同階段，因此研究者可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的激動(dòng)劑或抑制劑。更多細(xì)胞自噬通路調(diào)控藥物見(jiàn)圖3。
圖3.細(xì)胞自噬通路調(diào)控藥物
（Lorenzo Galluzi et al. Nat Rev Drug Discov, 2017 ）
5.細(xì)胞自噬檢測(cè)方法
在生理?xiàng)l件下，細(xì)胞自噬活性通常較低。但在饑餓、缺氧和疾病等刺激下細(xì)胞自噬活性會(huì)顯著上調(diào)。另外，細(xì)胞自噬抑制也與某些疾病相關(guān)，如癌癥、神經(jīng)退行性疾病和傳染病等。鑒于細(xì)胞自噬與不同的生理和病理生理過(guò)程之間存在緊密聯(lián)系，故科學(xué)工作者需要選擇理想的細(xì)胞自噬檢測(cè)方法。細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞自噬誘導(dǎo)或抑制后，常用的觀察和檢測(cè)方法有∶
5.1 透射電鏡法
細(xì)胞自噬體屬于亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，普通光鏡下看不到，直接在透射電鏡下觀察細(xì)胞自噬不同階段的形態(tài)變化是一種非常直接的方法。細(xì)胞自噬各階段的形態(tài)學(xué)特征見(jiàn)表3；透射電鏡下細(xì)胞自噬小體和細(xì)胞自噬溶酶體的形態(tài)見(jiàn)圖4。
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細(xì)胞自噬階段
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形態(tài)特征
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隔離膜
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新月?tīng)罨虮瓲?，雙層或多層膜，有包繞胞漿成分的趨勢(shì)。
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細(xì)胞自噬小體
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雙層或多層膜的液泡狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)含胞漿成分，如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體等。
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細(xì)胞自噬溶酶體
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單層膜，胞漿成分已降解。
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表3. 細(xì)胞自噬各階段特征
圖4. 透射電鏡下細(xì)胞自噬小體（單箭頭）和細(xì)胞自噬溶酶體（雙箭頭）形態(tài)
（Noboru, Mizushima et al. Cell, 2010）
5.2 熒光顯微鏡觀察法
LC3（light chain 3）全稱(chēng)MAP1LC3 (microtubule-associated proteins light chain 3)，貫穿整個(gè)細(xì)胞自噬過(guò)程，是目前公認(rèn)的細(xì)胞自噬標(biāo)記物。哺乳動(dòng)物中的LC3與酵母中的細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有同源性。哺乳動(dòng)物的LC3可分為三種：LC3A、LC3B和LC3C。其中，LC3B應(yīng)用最為廣泛。
LC3蛋白合成后在其羧基端被Atg4剪切掉C端5肽，暴露甘氨酸殘基，產(chǎn)生細(xì)胞漿定位的LC3-I。在細(xì)胞自噬過(guò)程中，LC3-I會(huì)被包括Atg7和Atg3在內(nèi)的泛素樣體系修飾和加工，與磷脂酰乙醇胺（PE）相偶聯(lián)，形成LC3-II并定位于細(xì)胞自噬體內(nèi)外膜上。細(xì)胞自噬體和溶酶體融合后，外膜上的LC3-II被Atg4切割，產(chǎn)生LC3-I循環(huán)利用；內(nèi)膜上的LC3-II被溶酶體酶降解，導(dǎo)致細(xì)胞自噬溶酶體中LC3含量很低（圖5）。因此，科研工作者可以通過(guò)熒光顯微鏡觀察內(nèi)源性LC3或GFP-LC3，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞自噬發(fā)生的檢測(cè)。
圖5. LC3在細(xì)胞自噬發(fā)生中的路徑
(Kiriyama, Y et al. International Electronic Conference on Medicinal Chemistry，2016)
GFP-LC3單熒光和mCherry-GFP-LC3雙熒光指示系統(tǒng)
細(xì)胞自噬形成時(shí)，GFP-LC3或mCherry-GFP-LC3融合蛋白轉(zhuǎn)移至細(xì)胞自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個(gè)明亮的綠色或黃色熒光斑點(diǎn)。當(dāng)細(xì)胞自噬溶酶體形成后，酸性的溶酶體環(huán)境使GFP熒光淬滅，而mCherry熒光不受影響，細(xì)胞自噬溶酶體呈現(xiàn)紅色熒光（圖6）。因此，科研工作者可以通過(guò)LC3熒光指示系統(tǒng)來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞自噬流。
圖6. LC3細(xì)胞自噬雙標(biāo)系統(tǒng)追蹤細(xì)胞自噬流不同階段
（Hansen T E, Johansen T. BMC Biology, 2011）
5.3 Western Blot檢測(cè)LC3和p62蛋白的表達(dá)量
① 利用Western Blot檢測(cè)LC3-II/I比值的變化以評(píng)價(jià)細(xì)胞自噬形成（圖7）。細(xì)胞自噬形成時(shí)，胞漿型LC3-I會(huì)酶解掉一小段多肽，隨后跟PE結(jié)合轉(zhuǎn)變?yōu)槟ば偷腖C3-II。因此可以通過(guò)LC3-II/I比值的大小估計(jì)細(xì)胞自噬水平的高低。
圖7. WB檢測(cè)LC3、p62蛋白的表達(dá)結(jié)果示意圖
（Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017.）
② 除LC3外，其他細(xì)胞自噬底物表達(dá)量的變化也可以用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞自噬流。其中，p62是研究廣泛的一個(gè)細(xì)胞自噬底物。p62（也稱(chēng)為SQSTM1蛋白），由以下三個(gè)結(jié)構(gòu)域組成：N端Phox和Bem1 (PB1)結(jié)構(gòu)域、鋅指結(jié)構(gòu)域和C端泛素相關(guān)(UBA)結(jié)構(gòu)域。研究表明，p62蛋白鋅指結(jié)構(gòu)域和UBA結(jié)構(gòu)域之間的連接區(qū)域（LRS區(qū)域）負(fù)責(zé)與細(xì)胞自噬受體蛋白 Atg8/LC3結(jié)合，UBA結(jié)構(gòu)域負(fù)責(zé)招募泛素化蛋白。在細(xì)胞自噬體形成過(guò)程中，p62作為鏈接LC3和聚泛素化蛋白之間的橋梁，被選擇性地包裹進(jìn)細(xì)胞自噬體，之后被細(xì)胞自噬溶酶體中的蛋白水解酶將其降解（圖8），所以p62蛋白的表達(dá)量與細(xì)胞自噬活性呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。因此，利用Western Blot檢測(cè)p62蛋白的表達(dá)量也可以用來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞自噬水平（圖7）。
圖8. p62介導(dǎo)的選擇性細(xì)胞自噬模型
（Ichimura Y et al. J Biol Chem, 2008）
5.4 基于Keima蛋白的細(xì)胞自噬評(píng)價(jià)
Keima是一種PH敏感型的熒光蛋白，其雙峰激發(fā)光譜依賴(lài)于周?chē)膒H值，在中性和酸性環(huán)境中分別在440 nm和586 nm處激活。Keima在中性和酸性pH中熒光信號(hào)不同的特性，可以直觀地反映細(xì)胞自噬程度。將細(xì)胞質(zhì)的Keima傳遞到溶酶體可反映非選擇性細(xì)胞自噬，將Keima融合到特定的蛋白(如融合到線粒體靶向序列—mt-Keima，作為線粒體細(xì)胞自噬標(biāo)記)可用于反映選擇性細(xì)胞自噬。值得注意是，基于keima的檢測(cè)不能在固定細(xì)胞中進(jìn)行，因?yàn)檫@種檢測(cè)完全依賴(lài)于溶酶體的酸性。
圖9. 基于Keima蛋白的細(xì)胞自噬評(píng)價(jià)
（Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017.）
6.維真細(xì)胞自噬相關(guān)產(chǎn)品
維真生物可提供細(xì)胞自噬研究相關(guān)工具，包含大量細(xì)胞自噬相關(guān)基因的現(xiàn)貨克隆，shRNA克隆，CRISPR克隆，以及LC3細(xì)胞自噬單雙標(biāo)克隆和病毒，多種策略、多種規(guī)格、部分現(xiàn)貨，滿(mǎn)足您多樣化的研究需求。
6.1 病毒產(chǎn)品
細(xì)胞自噬單雙標(biāo)病毒
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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熒光蛋白
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滴度
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AdV5-CMV-GFP-LC3
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GFP
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≥1*10E10pfu/ml
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AdV5-CMV-mCherry-GFP-LC3
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mCherry、GFP
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≥1*10E10pfu/ml
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AAV-CMV-GFP-LC3
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GFP
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≥1*10E13vg/ml
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AAV-CMV-mCherry-GFP-LC3
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mCherry、GFP
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≥1*10E13vg/ml
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注：?jiǎn)?dòng)子為CMV
圖10. 維真細(xì)胞自噬雙標(biāo)病毒載體圖譜
6.2 克隆產(chǎn)品
部分細(xì)胞自噬相關(guān)基因
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產(chǎn)品貨號(hào)
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基因名稱(chēng)
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基因編號(hào)
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基因長(zhǎng)度
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分類(lèi)
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CH842100
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ATG13
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NM_014741
|
1443 bp
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The ULK1 kinase core complex
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CH870272
|
ATG101
|
NM_021934
|
657bp
|
The ULK1 kinase core complex
|
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CH826495
|
BECN1/Beclin1
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NM_003766
|
1353bp
|
The class III PI3K complex I
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CH810399
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PIK3C3/VPS34
|
NM_002647
|
2664bp
|
The class III PI3K complex I
|
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CH841329
|
PIK3R4/VPS15
|
NM_014602
|
4077 bp
|
The class III PI3K complex I
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|
CH838864
|
ATG14/ATG14L
|
NM_014924
|
1479bp
|
The class III PI3K complex I
|
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CH854934
|
WIPI1
|
NM_017983
|
1341 bp
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The ATG9A/ATG2-WIPI1/2 trafficking system
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CH882336
|
WIPI2
|
NM_015610
|
1365 bp
|
The ATG9A/ATG2-WIPI1/2 trafficking system
|
|
CH821707
|
ATG12
|
NM_004707
|
423 bp
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The ATG12-conjugation system
|
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CH805558
|
ATG10
|
NM_031482
|
663 bp
|
The ATG12-conjugation system
|
|
CH828790
|
ATG5
|
NM_004849
|
828 bp
|
The ATG12-conjugation system
|
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CH886537
|
ATG16L1
|
NM_030803
|
1824 bp
|
The ATG12-conjugation system
|
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CH824179
|
MAP1LC3A/LC3A
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NM_032514
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366 bp
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The LC3-conjugation system
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CH837322
|
MAP1LC3B/LC3B
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NM_022818
|
378 bp
|
The LC3-conjugation system
|
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CH893675
|
MAP1LC3C/LC3C
|
NM_001004343
|
444 bp
|
The LC3-conjugation system
|
|
CH811236
|
ATG3
|
NM_022488
|
945 bp
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The LC3-conjugation system
|
|
CH878793
|
ATG4A
|
NM_052936
|
1197 bp
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The LC3-conjugation system
|
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CH896350
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ATG4B
|
NM_013325
|
1182 bp
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The LC3-conjugation system
|
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CH804672
|
ATG4C
|
NM_178221/
NM_032852
|
1377 bp
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The LC3-conjugation system
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CH800065
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ATG4D
|
NM_032885
|
1425 bp
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The LC3-conjugation system
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CH871029
|
ATG7
|
NM_006395
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2112 bp
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The LC3-conjugation system
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注：?jiǎn)?dòng)子為CMV，蛋白標(biāo)簽為C-terminal Flag&6×His
附：維真細(xì)胞自噬雙標(biāo)系統(tǒng)感染誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的HEK293細(xì)胞效果圖
7.客戶(hù)代表性文章（部分）
1.Autophagy. (IF=9.77). Peihua Luo, et al. (2020). PLK1 (polo like kinase 1)-dependent autophagy facilitates gefitinib-induced hepatotoxicity by degrading COX6A1(cytochrome coxidase subunit 6A1).［浙江大學(xué) AAV8- shPlk1 & Ad-mCherry-GFP-LC3B 肝功能障礙］
2.Aging (Albany NY). (IF=4.831). Chen Y, et al. (2020). Mitophagy impairment is involved in sevoflurane-induced cognitive dysfunction in aged rats.［浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院 Ad-CMV-mCherry-EGFP-LC3B 術(shù)后認(rèn)知功能障礙］
3.Toxicol Lett. (IF=3.569). Zhang L, et al. (2019). Endoplasmic reticulum stress and autophagy contribute to cadmium-induced cytotoxicity in retinal pigment epithelial cells. ［臺(tái)州市第一人民醫(yī)院 AAV-mCherry-eGFP-LC3B 視網(wǎng)膜色素上皮］
4.Molecular Cell. (IF=15.584). Wan, et.al. (2019). Pacer is a mediator of mTORC1 and GSK3-TIP60 signaling in regulation of autophagosome maturation and lipid metabolism.［浙江大AAV9-mCherry-GFP-LC3&AAV9-Pacerwt-HA&Pacer2KR-HA&PacerS157A-HA&PacerS157D-HA 肝細(xì)胞自噬和脂代謝］
5.Cell Physiol Biochem. (IF=5.5). Wang Y, et al. (2018). Inhibition of Histone Deacetylases Prevents Cardiac Remodeling After Myocardial Infarction by Restoring Autophagosome Processing in Cardiac Fibroblasts. ［浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院 Ad- mCherry-GFP-LC3 心臟重塑］
6.Biochemical and Biophysical Research Communications. (IF=2.985). Yang, et.al. (2018). Vaspin alleviates myocardial ischaemia/reperfusion injury via activating autophagic ?ux and restoring lysosomal function.［山東大學(xué)齊魯醫(yī)院 AAV-vaspin & Ad-RFP-GFP-LC3 心臟］
7.Mol Cell. (IF=15.584). Wan W, et al. (2018). mTORC1-Regulated and HUWE1-Mediated WIPI2 Degradation Controls Autophagy Flux. ［浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院 rAAV-shNC&rAAV-shHUWE1&rAAV-WIPI2-S395&rAAV-WIPI2-S395DAAAV-vaspin 細(xì)胞自噬流］
8.Molecular Cell. （IF=15.584）. Su, et al. (2017). VPS34 Acetylation Controls Its Lipid Kinase Activity and the Initiation of Canonical and Non-canonical Autophagy.［浙江大學(xué) AAV9-CMV-VPS34&3KR&3KQ 肝細(xì)胞自噬］
