DD/Shield1系統(tǒng)，實現(xiàn)蛋白可逆表達
1. DD是什么？
“不穩(wěn)定結(jié)構(gòu)域”（destabilizing domains，DD），是FK506-雷帕霉素結(jié)合蛋白FKBP突變體L106P，大小12kD。當(dāng)它與其它蛋白融合后,會由泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)被快速組成型降解。而當(dāng)加入細胞滲透性、能特異結(jié)合DD的小分子配體Shield1時,融合蛋白不再被降解,目的蛋白恢復(fù)行使正常的細胞功能，并且呈現(xiàn)可逆與劑量依賴性。因此,DD-Shield1系統(tǒng)能可逆控制蛋白表達，也正是因為這一點，被認定是一項有前途的技術(shù)正得到廣泛關(guān)注。
2. DD和Shield1的關(guān)系？
簡單來說，DD作為一個小型不穩(wěn)定蛋白與其他蛋白融合后，融合蛋白則被降解，Shield1則能抑制其降解，恢復(fù)融合蛋白的表達及生物學(xué)功能。
3. 生物學(xué)意義：
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利用蛋白穩(wěn)定性的藥物誘導(dǎo)表達系統(tǒng)（DD-Shield1系統(tǒng)）在活體內(nèi)和體外使某一基因可逆表達，利用這一系統(tǒng)可使因蛋白失活而表型改變的細胞或活體表型得到部分或全部恢復(fù)，這為細胞和活體生物嚴謹調(diào)控蛋白功能提供了一種新的策略。
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（https://obsidiantx.com）
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4.DD-Shield1系統(tǒng)優(yōu)勢：
快速： 在細胞水平上,Shield1可在15-30 min內(nèi)快速調(diào)節(jié)蛋白表達量，相反，在去除Shield1后，蛋白降解的半衰期可縮短至30分鐘；比轉(zhuǎn)錄開關(guān)機制或RNAi技術(shù)速度更快。
精確： DD-Shield1系統(tǒng)可以直接靶定蛋白,,通過調(diào)節(jié)Shield1濃度,可以精確調(diào)控融合蛋白的表達量；
可逆： 它可通過配體濃度變化可逆調(diào)控蛋白表達水平,彌補了其他條件性控制蛋白表達的不足，如Cre-loxP系統(tǒng)和四環(huán)素系統(tǒng)所造成的干擾是不可逆的；
5.維真DD-Shield1系統(tǒng)相關(guān)服務(wù)：
服務(wù)內(nèi)容： 維真可將不穩(wěn)定結(jié)構(gòu)域DD連接在您想要表達的蛋白之前，構(gòu)建融合蛋白表達載體，協(xié)助您研究蛋白可逆表達給細胞或者動物所帶來的生物學(xué)影響。
技術(shù)支持：
① DD誘導(dǎo)GFP蛋白的降解
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GFP對照
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DD-gfp對照
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分析：將GFP單獨表達的質(zhì)粒與DD-GFP融合表達的質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染293細胞，發(fā)現(xiàn)融合不穩(wěn)定蛋白DD后，GFP表達明顯降低；
說明，DD誘導(dǎo)了GFP蛋白的降解；
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② shield1可完全或者部分恢復(fù)GFP的表達
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DD-gfp
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Shield1
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（-）
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+（24h）
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+（48h）
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分析：與無配體處理的細胞相比，加入Shield1 配體（1μM）后，細胞中GFP恢復(fù)表達，且呈現(xiàn)一定的時間依賴性。
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