假病毒是指一種反轉(zhuǎn)錄病毒整合了另外一種病毒的囊膜糖蛋白,從而形成的具有外源性病毒囊膜,而基因組仍保持著反轉(zhuǎn)錄病毒本身基因組特性的病毒,又稱為假型病毒。
用帶有一種病毒外膜蛋白基因的質(zhì)粒與帶有另一種病毒骨架基因的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到包裝細(xì)胞(如293T細(xì)胞)中,外膜蛋白基因在包裝細(xì)胞表面表達(dá)出外膜蛋白,另一種病毒的基因在包裝細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄翻譯組裝成病毒顆粒,病毒顆粒出芽時(shí)會(huì)被細(xì)胞表面表達(dá)的外膜蛋白所包裝,即形成假病毒。
目前構(gòu)建假病毒的體系主要有兩種:一種是基于鼠類白血病病毒(MuLV)等反轉(zhuǎn)錄病毒載體的假病毒構(gòu)建體系;另一種是以慢病毒如(HIV-1)為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的假病毒構(gòu)建體系。以慢病毒載體為基礎(chǔ)的假病毒對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。
與自然源性病毒相比,假病毒感染系統(tǒng)主要具有以下優(yōu)勢(shì)∶
假病毒核酸分子上編碼囊膜蛋白的基因被修飾掉,因此不具備自我復(fù)制能力,只能進(jìn)行單一周期的侵染,不能再組裝成病毒顆粒。
可引入的報(bào)告基因主要有分泌型胎盤(pán)磷酸酯酶(SEAP)、β一半乳糖苷酶(Lac Z)、β一葡萄糖苷酸酶(GUS)、螢火蟲(chóng)熒光素酶(LUC)和綠色熒光蛋白(GFP)等,便于進(jìn)行定性和定量分析。
在研究致病性高,并目不易體外培養(yǎng)的病毒時(shí),制備假病毒是一種行之有效的、安全的、可信的方法。假病毒通常被用于病毒與宿主細(xì)胞間相互關(guān)系檢測(cè)、受體鑒定、中和抗體效價(jià)評(píng)價(jià)及基因治療等方面研究。