IF 14.5｜溫州醫(yī)科大學(xué)陳永平/潘彤彤/黃志鋒團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)FGF4是免疫性肝損傷的潛在治療新靶點(diǎn)！
免疫性肝損傷（ILI）是一種由各種觸發(fā)因素引起的異常免疫反應(yīng)導(dǎo)致肝細(xì)胞破壞的情況。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4（FGF4）最近被鑒定為一種肝保護(hù)性細(xì)胞因子，然而其在ILI中的作用尚不清楚。2023年12月，溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院陳永平/潘彤彤/黃志鋒團(tuán)隊(duì)在Acta Pharmaceutica Sinica B (IF 14.5)發(fā)表題為“FGF4 protects the liver from immune-mediated injury by activating CaMKKb-PINK1 signal pathway to inhibit hepatocellular apoptosis”的研究論文。文章揭示FGF4通過(guò)激活CaMKKβ-PINK1信號(hào)通路抑制肝細(xì)胞凋亡保護(hù)肝臟免受免疫介導(dǎo)的損傷，為臨床上免疫紊亂相關(guān)肝損傷的潛在治療策略提供了新的線索。
研究結(jié)果
1、肝細(xì)胞特異性Fgf4缺失加重ConA和S-100誘導(dǎo)的肝損傷
作者發(fā)現(xiàn)輕度肝損傷患者的肝臟FGF4 mRNA和蛋白水平升高，但嚴(yán)重肝損傷患者的肝臟FGF4則顯著降低，甚至低于健康人肝臟中的表達(dá)水平；利用刀豆蛋白A(ConA)和S-100誘導(dǎo)小鼠急、慢性ILI，小鼠肝FGF4的mRNA和蛋白水平的變化類似于肝損傷患者病理進(jìn)展，表明肝細(xì)胞中FGF4的表達(dá)是ILI發(fā)病過(guò)程中對(duì)肝損傷的早期反應(yīng)。為了解內(nèi)源性Fgf4在ILI中的作用，作者建立了肝細(xì)胞特異性Fgf4缺失（Fgf4-/-或Fgf4-LKO）的小鼠模型，分別利用ConA和S-100誘導(dǎo)小鼠急、慢性ILI，數(shù)據(jù)顯示肝臟FGF4缺乏加劇了免疫介導(dǎo)的肝臟炎癥和損傷，表明FGF4可能對(duì)急性和慢性ILI具有保護(hù)作用；此外，通過(guò)給小鼠施加不同劑量的重組FGF4（rFGF4），顯著改善了ConA和S-100誘導(dǎo)的肝損傷。
肝細(xì)胞特異性缺失Fgf4加重ConA和S-100誘導(dǎo)的肝損傷
2、rFGF4靶向肝細(xì)胞FGFR4，保護(hù)肝臟免受ILI誘導(dǎo)的損傷
作者先前的研究證明rFGF4作用于肝細(xì)胞FGFR4，為了確定rFGF4對(duì)ILI相關(guān)肝損傷的保護(hù)作用是否也由肝細(xì)胞FGFR4介導(dǎo)，作者檢測(cè)了在這些條件下Fgfrs 表達(dá)水平的變化，發(fā)現(xiàn)在ConA處理后的肝細(xì)胞中，F(xiàn)gfr4 mRNA和蛋白水平顯著增加。此外，作者構(gòu)建了AAV8-TBG介導(dǎo)的Fgfr4 shRNA，特異性降低肝細(xì)胞中的Fgfr4，F(xiàn)gfr4的敲低顯著減弱了rFGF4對(duì)ConA誘導(dǎo)的肝損傷的保護(hù)作用，由于rFGF4對(duì)T細(xì)胞增殖沒(méi)有顯著影響，上述數(shù)據(jù)表明rFGF4對(duì)ILI的保護(hù)作用取決于肝細(xì)胞FGFR4的激活，而不是對(duì)免疫細(xì)胞的直接作用。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)在ILI條件下FGF4主要通過(guò)抑制肝細(xì)胞內(nèi)在凋亡途徑，減少凋亡誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞浸潤(rùn)，減輕炎癥和肝損傷。
FGF4靶向肝臟FGFR4以對(duì)抗ILI
3、FGF4通過(guò)激活CaMKKβ/PINK1/Bcl-XL通路保護(hù)肝臟免受ILI的影響
先前的研究表明，F(xiàn)GFR二聚化激活PLCγ以增加細(xì)胞質(zhì)Ca2+濃度，從而刺激CaMKKβ/AMPK信號(hào)通路，促進(jìn)顯著的低血糖、降脂和抗凋亡作用。Ca2+在不同細(xì)胞器中的分布和隨后CaMKKβ通路的激活是影響mPTP開(kāi)放的重要因素，mPTP可觸發(fā)內(nèi)源性細(xì)胞凋亡。RNA-seq數(shù)據(jù)表明，F(xiàn)GF4激活的途徑主要影響Ca2+的釋放，這與Camkkβ/CAMK1D的mRNA表達(dá)水平的變化一致。PINK1是CaMK1的同源物，已知可激活下游靶點(diǎn)Bcl-XL（Ser62），從而阻止mPTP開(kāi)放，作者發(fā)現(xiàn)Pink1和Bcl-XL的mRNA水平在肝Fgf4缺乏時(shí)下調(diào)，但在rFGF4給藥時(shí)上調(diào)。進(jìn)一步的研究表明，在HEK293細(xì)胞中CaMKKβ與PINK1存在相互作用，F(xiàn)GF4通過(guò)激活CaMKKβ/PINK1/Bcl-XL通路調(diào)節(jié)肝細(xì)胞mPTP開(kāi)放和內(nèi)在細(xì)胞凋亡。此外，CaMKKβ-KO小鼠模型結(jié)合AAV8-TBG介導(dǎo)的Pink1敲低，明顯加重了ConA誘導(dǎo)的肝細(xì)胞死亡，并消除了rFGF4對(duì)肝損傷的保護(hù)作用。
FGF4通過(guò)激活CaMKKβ/PINK1/Bcl-XL通路保護(hù)肝臟免受ILI的影響
小結(jié)
本研究表明肝臟FGF4激活FGFR4-CaMKKβ-PINK1-Bcl-XL信號(hào)通路，抑制與線粒體膜電位和完整性相關(guān)的肝細(xì)胞內(nèi)在凋亡，從而保護(hù)肝臟免受免疫紊亂誘導(dǎo)的損傷，為免疫紊亂相關(guān)肝病的治療提供了新的思路。
