一、PCSK9簡介
PCSK9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9):前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶9,kexin樣前轉(zhuǎn)化酶枯草桿菌蛋白酶家族的第九個成員,由定位于染色體1p32.3的PCSK9基因編碼的692個氨基酸組成。PCSK9屬于一種細胞內(nèi)“轉(zhuǎn)化酶”或脫羧酶, 主要在肝臟、腸道表達, 在腎臟、腦等中也有少量表達[1,2]。
二、PCSK9在動脈粥樣硬化中的作用
PCSK9是近年來新發(fā)現(xiàn)的常染色體顯性高膽固醇血癥相關(guān)基因, 其編碼蛋白可以與肝細胞表面低密度脂蛋白受體 (low density lipoprotein receptor, LDLR) 結(jié)合, 構(gòu)成復合物并靶向轉(zhuǎn)運到溶酶體內(nèi)進行降解, 從而阻斷LDLR在細胞膜表面的循環(huán)途徑, 抑制低密度脂蛋白膽固醇 (low density lipoproteincholesterol, LDL-C) 通過LDLR轉(zhuǎn)運從體內(nèi)清除代謝, 使得血漿中LDL-C升高, 最終導致動脈粥樣硬化 (atherosclerosis, AS) 的形成[3,4 ]。目前,PCSK9已經(jīng)成為降脂藥物研發(fā)及動脈粥樣硬化(atherosclerosis,As)干預的熱門靶點。
三、AAV-PCSK9造模方法
利用小鼠構(gòu)建動脈粥樣硬化的模型,通常用如下方法:包裝PCSK9腺相關(guān)病毒 (rAAV-D377Y-mPCSK9/ rAAV-D374Y-hPCSK9) , 通過 靜脈注射 的方法,將 2-5×10E11vg病毒 注射至8周齡左右的小鼠體內(nèi),然后 高脂飲食喂養(yǎng)12周后 進行取材檢測。
文獻來源: 《Induction of Atherosclerosis in Mice and Hamsters Without Germline Genetic Engineering》;
四、維真AAV-PCSK9現(xiàn)貨
以往研究者通常僅從動物喂食的飼料著手,通過誘導飲食來制作動脈粥樣硬化模型,隨著后續(xù)研究的不斷深入,PCSK9腺相關(guān)病毒注射配合高脂高膽固醇飲食,已經(jīng)逐漸成為動脈粥樣硬化的理想造模方式。
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相關(guān)文獻參考:
1. Schulz R, Schlüter KD, Laufs U.Molecular and cellular function of the proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) [J].Basic Res Cardiol, 2015, 110 (2) :1-19.
2. Seidah NG, Sadr MS, Chrétien M, et al.The multifaceted proprotein convertases:their unique, redundant, complementary, and opposite functions[J].J Biol Chem, 2013, 288 (30) :21473-21481.
3. Alkindi M, Siminovitch KA, Gupta M, et al.Monoclonal antibodies for the treatment of hypercholesterolemia:targeting PCSK9[J].Can J Cardiol, 2016, 32 (12) :1552-1560
4. Alallaf F, H Nazar FA, Alnefaie M, et al.The spectrum of familial hypercholesterolemia (FH) in Saudi Arabia:prime time for patient FH registry[J].Open Cardiovasc Med J, 2017, 11:66-75